Prenatal diagnosis of Pompe's disease (type ii glycogenosis) in chorionic villus biopsy using maltose as a substrate

Uncultured trophoblasts obtained from chorionic villus biopsy during the gestation period of 8–12 weeks were assayed for alpha-glucosidase activity using maltose as the substrate. Only one major form of maltase activity with a pH optimum at 4.0 was demonstrated. Using this method, we performed prenatal diagnosis on three pregnancies at risk for the infantile form of type II glycogen storage disease. Two affected fetuses and one unaffected fetus were predicted and the diagnosis was subsequently confirmed. The maltose assay offered a direct, simple, and sensitive method for prenatal diagnosis of Pompe's disease in the first trimester.     

间接免疫荧光抗体技术检测凡纳滨对虾红体病病原——副溶血弧菌

建立了凡纳滨对虾红体病病原--副溶血弧菌的间接免疫荧光抗体检测方法.确定免疫血清和荧光抗体的最适工作浓度分别为1∶ 1000和1∶ 200;交叉反应和阻断试验表明该方法具有较高的特异性.用该方法检测了10份人工感染后发病的凡纳滨对虾和10份感染后外观健康的凡纳滨对虾,阳性检出率分别为100%和60%,表明该技术不仅能够检测已发病的凡纳滨对虾,而且能够检测带菌的凡纳滨对虾,这对于水产养殖业中疾病的早期诊断有着重要意义,而且该方法具有快速、特异、简单的优点,适合于现场应用推广.     

一种水质污染生物监测的新方法——蝌蚪肠细胞染色体畸变分析

发展了一种水生脊椎动物蝌蚪肠细胞染色体畸变的分析方法,可作为诱变剂污染水源的早期报警系统。该方法的优点:1)灵敏度高;2)蝌蚪在我国分布广、数量多、捕捉方便、费用低、易饲养管理。尤其是蝌蚪的核型由22条大的中部和亚中部着丝点染色体所组成,适于毒理遗传学研究;3)蝌蚪具有转化前诱变剂或前致癌剂为活性成份的微粒体活化系统。     

大气飘尘致癌物与DNA加合物的^32P后标记分析

采用~(32)P后标记分析法,测定上海市大气飘尘中致癌物与DNA形成加合物的能力。先将飘尘行机提取物,按一定剂量涂抹到小鼠皮肤上作用一定时间;然后,处死小鼠,取涂抹部位皮肤提取DNA,用~(32)P后标记法分离测定DNA中致癌物,即DNA加合物。结果表明,上海市大气飘尘有机提取物可以与皮肤DNA形成多个加合物斑点,提示上海市大气飘尘存在一定的致癌危险性。     

间接竞争ELISA法测定稻田土壤中除草剂毒莠定的残留量

通过对反应体系中酶标二抗(辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG)和抗体的最佳稀释浓度等条件的筛选和确定,最终建立了一种快速灵敏地测定污染稻田土壤中毒莠定残留量的方法--间接竞争ELISA分析方法.结果表明,酶标二抗和抗体的最佳稀释度均为1:500(体积比),毒莠定的检出下限达到5 ng·mL-1,在0.07～0.7μg·mL-1浓度范围内有良好的线性;土壤浸出液加样的平均回收率为104.11%,变异系数在3.13%～11.13%之间,符合农药残留分析的要求;样品基质对检测结果没有干扰.     

失去记忆性贝毒ASP酶联免疫检测方法的研究

建立了赤潮毒素失去记忆性贝毒中主要成分软骨藻酸(domoic acid,DA)的竞争酶联免疫检测方法.通过将DA偶联到蛋白载体上,免疫BALB/c小鼠,免疫数次后,得到抗DA的多克隆抗血清,以DA-OVA为包被抗原,利用抗原抗体反应,建立间接竞争酶联免疫吸附技术(Enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)分析检测海水样品和海洋贝类中的赤潮毒素失去记忆性贝毒DA的方法.结果表明,该方法最低检出限10μg/L,海水样品平均回收率102.%,批内变异系数12.%;贝类样品平均回收率为111.%,批内变异系数4.8%.     

慧星试验对水体安全性分析研究

利用彗星试验检测苏南某湖泊湖心区、长江某取水口及其给水处理厂出水水样的遗传毒性,并对结果进行分析研究.结果表明,各水样均能引起DNA损伤,在丰水期致DNA损伤作用的大小顺序为给水厂出水水样＞湖泊水样＞长江取水口水样;在枯水期致DNA损伤作用的大小顺序为湖泊水样＞长江取水口水样＞给水厂出水水样.随着染毒剂量的加大,细胞损伤率增加,细胞受损的程度也在加重,并向3、4级损伤集中,呈明显的剂量-效应关系.     

采用生物发光检测法进行Ames试验的研究

将自行构建的含有青海弧菌荧光酶基因的质粒pACYCL184引入Ames试验的4个菌株TA97、TA98、TA100、TA102中,构建成能够生物发光的工程菌,分别命名为TAL97、TAL98、TAL100、TAL102.实验表明,该4株工程菌保持原出发菌株所具有的与Ames试验相关的性状,对各类致突变剂有良好的反应,且可用平皿计数法进行致突变试验.其发光值与致突变剂浓度存在良好的量效关系,故可用发光检测取代原Ames试验的平皿计数,使检测更简单、方便、快速.图3表3参11     

铜暴露下赤子爱胜蚓（Eisenia foetida）活体基因的损伤研究

通过碱性单细胞凝胶电泳法研究了Cu2+暴露剂量对赤子爱胜蚓(Eiseniafoetida)活体基因损伤的动态影响.结果显示:不添加Cu2+的对照组和添加Cu2+的处理组蚯蚓体腔细胞尾部DNA含量和尾长均呈非正态分布(p<0.05);在暴露72h时,125mg·L-1Cu2+处理组尾部DNA含量值最大,为41.44%,100mg·L-1Cu2+处理组尾长值最大,为33.79μm;随着Cu2+暴露剂量的增加,尾部DNA含量和尾长损伤频率增加;对照组和处理组的尾部DNA含量和尾长之间均存在显著性差异(p<0.05),Spearman非参数相关分析表明,尾部DNA百分含量和尾长之间呈显著相关(p<0.01,n=21),Cu2+暴露浓度与尾部DNA百分含量、尾长具有良好的剂量-构效关系(p<0.01).在125mg·L-1Cu2+浓度下暴露72h时蚯蚓的基因损伤程度达到最大,损伤程度为3级.可见,蚯蚓DNA生物标志物是重金属污染基因毒理诊断的重要指标,碱性SCGE试验是检测Cu2+暴露对赤子爱胜蚓活体基因损伤的有效手段.     

东湖“赤潮”的成因分析及发展趋势

2003年3月下旬东湖水质发生了异常现象,为找到水质明显变化的原因,武汉市环境监测中心站通过及时布点取样分析,监测分析水中的生物群落结构,确认东湖发生了"赤潮",并找出了污染源头。通过跟踪监测,了解多甲藻的变化趋势,并提出对涉及外来物种等海洋馆类建设项目的强化管理的建议。